Introducción: La aparición de especies bacterianas productoras de betalactamasas de espectro extendido (BLEE), constituye un serio  problema de salud  porque deja pocas alternativas de tratamiento y un aumento en los costos por prolongación de la hospitalización. El laboratorio de Microbiología  juega un papel importante con su diagnóstico precoz. Se realizó el estudio con el objetivo de determinar el comportamiento de las Enterobacterias productoras de BLEE en niños con infección urinaria. Material y Métodos: Se realizó  un estudio observacional descriptivo de corte transversal en Enterobacterias productoras de BLEE  provenientes de urocultivos de pacientes ingresados y ambulatorios del Hospital Pediátrico Provincial José Martí  de Sancti Spíritus en el período comprendido del 1º de septiembre al  31 de diciembre del 2013. Se utilizó como método preliminar el de Kirby-Baüer, siguiendo los lineamientos del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI); a los aislamientos sospechosos se les realizó como confirmación la prueba de aproximación de doble disco (DD). Resultados: Un 88.3% correspondió a Escherichia coli y 11.6  Klebsiella oxytoca, El 46.5 % fueron menores de un año y el 34.8 al grupo 1 a 5, la procedencia ambulatoria fue de 76.3%. Escherichia coli mostró una resistencia  a la amikacina de un 58.82% y Klebsiella pneumoniae de un 61.54%. Ambas mostraron   resistencia casi total a las cefalosporinas de tercera generación; así como al aztreonam en un 63.89% Conclusiones: Los menores de un año  seguido  de 1 a 5 fueron los de mayor aislamiento predominando. Escherichia coli  Las cepas  fueron multirresistentes, con corresistencia a aminoglucósidos, siendo la ciprofloxacina y los carbapenémicos los  más efectivos in vitro.